Ici sont présentés une grande partie des personnages de la série Bob l'Éponge. J'ai distingué 3 catégories : les personnages principaux, les personnages secondaires qui reviennent dans plusieurs épisodes et les personnages "épisodiques" qui n'apparaissent que dans quelques épisodes.
Ce poisson lune est la directrice et monitrice de l'école de conduite de Bikini Bottom. Dans Le permis par KO, on apprend qu'elle a du quitter son ancienne vie pour créer une nouvelle école en ville sous un nouveau nom.
Madame Puff adore son travail, elle est très dévouée, sauf envers son pire élève Bob l'Éponge. Celui-ci est très sérieux dans ses études mais quand il s'agit de pratique, il rate toujours son permis. Madame Puff est donc plus ou moins condamnée à avoir Bob comme élève jusqu'à la fin de sa vie.